双向电泳蛋白质组学（2-D Electrophoresis Proteomics）是通过结合等电聚焦（IEF）和SDS-PAGE双重电泳技术研究细胞、组织或生物体中全部蛋白质的表达、结构、功能、相互作用以及动态变化的分析方法。其核心是分离样品中的蛋白质分子，根据其等电点和分子量实现高分辨率的分离。双向电泳是一种分离蛋白质的技术，它结合了等电聚焦电泳（第一向）和 SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳（第二向）。等电聚焦电泳是根据蛋白质的等电点（pI）进行分离，使蛋白质在 pH 梯度中聚焦于其等电点位置。SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳则是基于蛋白质的分子量大小对其进行分离。通过这两个方向的连续电泳，可以在二维平面上分离出复杂的蛋白质混合物，从而得到蛋白质的二维图谱，图谱中的每个点通常代表一种蛋白质。该技术可用于研究细胞、组织或生物体在不同条件下的蛋白质表达变化，进而揭示生物过程中发生的变化机制。在疾病研究中，双向电泳蛋白质组学被用来寻找疾病的标志物，了解病理机制，并发现潜在的治疗靶点。例如，癌症研究中，双向电泳技术可以识别肿瘤细胞中异常表达的蛋白质，帮助理解肿瘤的发生发展。在药物研究中，此技术用于评估药物作用的分子机制以及对生物系统的影响。此外，在农业领域，双向电泳蛋白质组学也用于分析作物的抗逆性和营养价值，助力农作物的改良和优化。

一、双向电泳蛋白质组学的常见方法和流程

1、样品制备

样品的纯度和浓度直接影响电泳图谱的清晰度。通常，研究人员采用高效的蛋白质提取和纯化方法，确保获取高质量的蛋白质样品。

2、等电聚焦（IEF）

在第一维电泳中，样品中的蛋白质在pH梯度凝胶中移动，直到其净电荷为零，即等电点。该过程能够将蛋白质根据其等电点进行分离，提供高分辨率的分离效果。

3、SDS-PAGE

第二维电泳通过SDS-PAGE技术，根据分子量进一步分离蛋白质。在此过程中，蛋白质在SDS的作用下解链，并在电场中移动，使得同等电点但不同分子量的蛋白质被有效分离。

4、染色与成像

完成双向电泳后，需对凝胶进行染色，以便可视化蛋白质斑点。常用的染色方法包括考马斯亮蓝染色（Coomassie Brilliant Blue）和银染。

5、图像分析与数据处理

使用专业软件对凝胶图像进行分析，识别和量化蛋白质斑点。数据处理阶段涉及蛋白质的鉴定与功能分析。

二、注意事项

1、样品制备的关键性

为确保电泳结果准确，样品制备时需保持蛋白质的完整性，避免降解和污染。

2、pH梯度的选择

根据研究目标选择合适的pH梯度以优化蛋白质的分离效果。

3、防止蛋白质聚集

使用尿素等物质防止蛋白质聚集，确保电泳过程中蛋白质的均匀分布。

三、技术优势与常见问题

1、高分辨率与重现性

双向电泳蛋白质组学能够提供高分辨率的蛋白质分离效果，并具有良好的重现性。

2、复杂样品处理能力

该技术能够处理复杂的生物样品，适用于多种研究领域。

3、常见问题

主要包括蛋白质斑点漂移、重现性差等，这些问题可以通过优化实验条件加以改善。

凭借丰富的经验和先进的技术平台，获国家CNAS实验室认可，百泰派克生物科技提供全方位的双向电泳蛋白质组学分析服务。我们以高质量的服务和科学的研究方案，帮助客户在生命科学研究中取得突破性进展。欢迎有需求的客户与我们联系，共同推进生命科学的前沿研究。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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